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本文標題:"纖溶性微生物分解纖維素的過程緩慢且不完全"

新聞來源:未知 發布時間:2017-8-30 3:08:43 本站主頁地址:http://www.027toilet.cn

纖溶性微生物分解纖維素的過程緩慢且不完全

    纖溶性微生物分解纖維素的過程緩慢且不完全,因此有必要通
過基因工程手段來制造一種具有更有效的纖維素酶活性的微生物:
為此.從原核生物和真核生物中分離出編碼纖維素酶活性中具有不
同酶功能的基因。
    通過下列簡單而有效的技術可以克隆原核生物內切葡聚糖酶基
因。
    ①在大腸桿菌中構建纖溶性原核生物的DNA基因庫,宿主菌在
加有選擇抗生素固體培養基上過夜培養。
    ②菌落在含有羧甲基纖維素(CMC.一種可溶的纖維素衍生物)
的瓊脂上生長。平板37℃培養幾個小時內,在合成和分泌內切葡聚
糖酶菌落近處的羧甲基纖維素分子將被部分消化。合成非分泌型內
切葡聚糖的轉化子不能分解底物,這是因為這些底物體積太大,不
能進入細胞。
    ③消化的CMC區域先用對細菌無毒的剛果紅染料浸泡,冉用NaC
l沖洗。剛果紅選擇性吸附于高分子量的纖維素鏈中,顯示出紅色
;相對而言.它時小分子量的多糖黏附性差而顯黃色。NaCl處理使
染料的結合更加穩定,如果細菌菌落產生一種分泌型的內切葡聚糖
酶,它的周圍會產生一個黃暈環;沒有被降解的CMC作為背景.呈
紅色

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