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本文標題:"用光密計量學定量影像和用磷光成像在凝膠中直接檢測"

新聞來源:未知 發布時間:2017-3-10 23:38:45 本站主頁地址:http://www.027toilet.cn

用光密計量學定量影像和利用磷光成像在凝膠中直接檢測

    單元7.7介紹了免疫印跡的實驗方法(也稱為Western blottin
g)。在該技術中,通過單元7.1中所述電泳技術分離得到的蛋白質
被電泳轉移到一個薄膜之上(“電印跡”),該薄膜就成為聚丙烯酰
胺凝膠的一個復本,隨后用帶有特定蛋白抗體的探針進行檢測。一
抗可通過和125I標記的二抗或蛋白質A一起孵育,自顯影后顯像(單
元7.8)。近年來,放射性碘標記抗體方法已逐漸被非放射性的酶
偶聯抗體如堿性磷酸酶或辣根過氧化酶(單元4.4)方法所取代,通
過酶作用于底物將其轉化為有色、發光或具有熒光的物質。非放射
性的方法與放射性的方法具有一樣的敏感性,其更大的優勢在于不
需要在使用放射性時進行特別的防護。非放射性的檢測是現今肉眼
觀察免疫印跡蛋白質的可行方法。非放射性方法的缺點是它們檢測
的線性范圍比較狹窄,同時該方法必須要求精確的蛋白質定量,可
能也是該技術存在的另一個問題。
    如何利用放射性自顯影的方法使電泳分離的放射性標記的蛋白
質和碘標記抗體或蛋白質A免疫印記檢測到的蛋白質顯像的方法。
該技術利用放射源發出的射線使光學膠卷顯影以達到顯像的目的。
在該技術中,可采取增強顯示或使用發光化合物的方法提高敏感度
,使放射性吸收基團發光從而形成影像。這一節介紹了幾種不同放
射源自顯影的檢測方法,以及用增強顯示或使用熒光以增強信號的
方法利用光密計量學定量影像和利用磷光成像在凝膠中直接檢測和
定量放射性樣品的方法

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