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滅菌前必須檢查鍋中水是否適量-培養基實驗
滅菌過程
(1)加水:滅菌前必須檢查鍋中水是否適量,如果水沒有到標
示線,加人適量蒸餾水。加水步驟非常重要,如果鍋中水太少而使
用滅菌鍋,會燒壞滅菌鍋,嚴重時會造成事故。
(2)裝鍋:把需滅菌的器物放入鍋內,鍋中器物不要裝得太滿,
否則滅菌將不徹底。關嚴鍋蓋,按對角方式均勻擰緊螺旋,打開排
氣閥。
(3)啟動:用電源的則啟動開關。熱源為蒸汽的則慢慢打開蒸
汽口,應避免蒸汽進入過猛。
(4)關閉排氣閥:鍋內水沸騰后,產生的蒸汽將鍋內冷空氣驅
凈,當溫度計指針指向100℃時,鍋內已充滿蒸汽,這時關閉排氣
閥o
(5)升壓、升溫:關閉排氣閥以后,鍋內成為密閉系統,蒸汽不
斷增多,鍋中壓力和溫度上升。當壓力達到0.105MPa(此時溫度
為121℃)時,滅菌開始。維持壓力在0.105MPa共15~30min,以保
證滅菌徹底。除含糖培養基用0.056MPa(112℃)壓力滅菌外,一
般用0.105MPa壓力滅菌。
(6)滅菌停止:當滅菌完成后,停止加熱,任其自然降壓,當指
針回到零時,打開排氣閥。特別注意的是,排氣閥不能過早打開,
否則因壓力突然下降,溫度還沒有及時下降,培養基會沸騰,從而
有可能損失培養基,并玷污棉塞、器皿、滅菌鍋等。
(7)保存:培養基冷卻后,放入冰箱或陰涼處保存備用。
濕熱滅菌除高壓蒸汽滅菌外,還可以在常壓下滅菌,即間歇滅
菌,該方法適用于某些易受高溫破壞培養基的滅菌。間歇滅菌一
般在100℃煮30。60min后冷卻,置于37℃培養24h,重復三次。
為確保無菌,37℃培養24h后,檢查是否已滅菌徹底。
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