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一旦種植了原代細胞,細胞會處于一個高度營養的條件下,
貼附到底物上,但是,絕大多數細胞會死亡或發生分化。培養2~3
d后,增殖性細胞會離開組織培養皿底部,聚集成神經球樣的細胞
團,通常培養48h可以觀察到。這些聚集的細胞團不應被誤認為原
代神經球。聚集細胞團塊的數量直接與培養基中細胞碎片和死細胞
數量有關。通常情況下,這些假神經球是很大的,但是它們是由小
的、變黑的、形狀不規則的細胞組成的。
pH誘導法
將相對接合型的兩種純系培養液各1 mL混合于小培養皿中,然
后分別向混合培養液中加入新鮮配制的一定pH梯度的培養液2 mL。
在20~25℃下培養。將小培養皿直接置于體視顯微鏡下觀察。
測定培養溫度,準確記錄出現接合生殖相的pH值、接合生殖率
最高時的pH值、接合生殖相不再出現時的pH值,尋找不同pH值下接
合生殖率的變化規律,分析變化原因。通過計算接合生殖率找出誘
導接合生殖的最適pH值。
每個組合設3個重復,需同學們協作完成。
溫度誘導法
先通過智能恒溫培養箱找出致死大草履蟲的最高溫度、最低溫
度,以確定大草履蟲存活的溫度范圍。
將相對接合型的兩種純系培養液和新鮮培養液各l mL混合于小
培養皿中,然后分別放入恒溫培養箱中培養,在大草履蟲存活的溫
度范圍內,以1℃為梯度改變培養溫度。2 h后,每隔10 min將小培
養皿直接置于體視顯微鏡下觀察,以判斷是否出現接合生殖相。每
個組合設3個重復。
測定培養液的pH值,準確記錄開始出現接合生殖相的溫度、接
合生殖率最高時的溫度、接合生殖相不再出現時的溫度,尋找不同
溫度下接合生殖率的變化規律,分析變化原因。依據接合生殖率找
出誘導接合生殖的最適溫度。
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